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assets/sample_fastqs/variola/VARV_RZ10_3587_R2.fastq.gz rename to assets/sample_fastqs/variola/PP405578_R2.fastq.gz diff --git a/assets/sample_metadata/VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx b/assets/sample_metadata/VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx index 81899d70..97c80044 100644 Binary files a/assets/sample_metadata/VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx and b/assets/sample_metadata/VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx differ diff --git a/assets/sample_metadata/~$VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx b/assets/sample_metadata/~$VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx new file mode 100644 index 00000000..5a932052 Binary files /dev/null and b/assets/sample_metadata/~$VARV_metadata_Sample_Run_1.xlsx differ diff --git a/assets/sample_metadata/~$custom_fields_MPXV_metadata_Sample_Run_1.xlsx b/assets/sample_metadata/~$custom_fields_MPXV_metadata_Sample_Run_1.xlsx new file mode 100644 index 00000000..5a932052 Binary files /dev/null and b/assets/sample_metadata/~$custom_fields_MPXV_metadata_Sample_Run_1.xlsx differ diff --git a/bin/repeatmasker_liftoff.py b/bin/repeatmasker_liftoff.py index 939e3c8a..f954e40e 100755 --- a/bin/repeatmasker_liftoff.py +++ b/bin/repeatmasker_liftoff.py @@ -23,11 +23,22 @@ def get_args(): parser.add_argument("--refgff", type=str, help="Reference GFF to gather the ITR attributes and sample ID \n", required=True) parser.add_argument("--fasta", type=str, help="FASTA file for sample \n", required=True) parser.add_argument("--outdir", type=str, default=".", help="Output directory, defualt is current directory") + parser.add_argument("--sample_name", type=str, default=".", help="Sample name") args = parser.parse_args() return args +def count_rows_starting_with_comment(file_path): + count = 0 + with open(file_path, 'r') as file: + for line in file: + if line.startswith('#'): + count += 1 + else: + break # Stop counting once a line is encountered that doesn't start with '#' + return count + def annotation_main(): """ Main function for calling the annotation transfer pipeline """ @@ -44,9 +55,10 @@ def annotation_main(): headerList = ['seq_id', 'source', 'type', 'start', 'end', 'score', 'strand', 'phase', 'attributes'] #####GATHER REF INFO##### - #load in repeatmasker gff skip commented lines that dont belong in dataframe - ref_gff = pd.read_csv(args.refgff, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=headerList, comment='#') + #ref_gff = pd.read_csv(args.refgff, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=headerList, comment='#') + ref_gff = pd.read_csv(args.refgff, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=headerList, skiprows=count_rows_starting_with_comment(args.refgff)) + #gather ref sample id ref_id=ref_gff['seq_id'][0] #gather index of attributes for first and second ITRs; needed for repeatmasker ITR attributes @@ -63,10 +75,10 @@ def annotation_main(): #samp_name=repMannotation_prep.sample_info()[0] #repMannotation_prep.repM_prep_main() - LOannotation_prep=Liftoff_Annotations(args.liftoff_gff, headerList, samp_name, args.outdir) + LOannotation_prep=Liftoff_Annotations(args.liftoff_gff, headerList, args.sample_name, args.outdir) #LOannotation_prep.LO_prep_main() #repMannotation_prep.sample_info() - new_gff=concat_gffs(args.liftoff_gff, repMannotation_prep.repM_prep_main(), LOannotation_prep.LO_prep_main(), ref_id, samp_name, args.outdir) + new_gff=concat_gffs(args.liftoff_gff, repMannotation_prep.repM_prep_main(), LOannotation_prep.LO_prep_main(), ref_id, args.sample_name, args.outdir) new_gff.concat_LO_RM() @@ -74,7 +86,7 @@ def annotation_main(): main_util=MainUtility() main_util.gff2tbl( samp_name=samp_name, - gff_loc=f"{args.outdir}/{samp_name}_reformatted.gff", + gff_loc=f"{args.outdir}/{args.sample_name}_reformatted.gff", tbl_output=f"{args.outdir}/" ) @@ -121,7 +133,7 @@ def sample_info(self): def cleanup_repeat_masker_gff(self): #load in repeatmasker gff skip the first two lines that dont belong in dataframe - rem_gff = pd.read_csv(self.repeatMGFF, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=self.headerList, comment='#') + rem_gff = pd.read_csv(self.repeatMGFF, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=self.headerList, skiprows=count_rows_starting_with_comment(self.repeatMGFF)) #correct repeat region labels; repeatmasker labels repeat regions as dispersed_repeat rem_gff['type'] = rem_gff['type'].replace({'dispersed_repeat': 'repeat_region'}, regex=True) @@ -213,7 +225,7 @@ def LO_prep_main(self): fields_to_drop = ['coverage', 'sequence_ID', 'matches_ref_protein', 'valid_ORF', 'valid_ORFs', 'extra_copy_number', 'copy_num_ID', 'pseudogene', 'partial_mapping', 'low_identity'] #load in liftoff gff with same headers as Repeatmasker and skip commented lines at dont belong to dataframe - lo_gff = pd.read_csv(self.liftoffGFF, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=self.headerList, comment='#') + lo_gff = pd.read_csv(self.liftoffGFF, delimiter='\t', skip_blank_lines=True, names=self.headerList, skiprows=count_rows_starting_with_comment(self.liftoffGFF)) #run function to find and drop fields in attributes lo_gff['attributes']=lo_gff['attributes'].apply(lambda row : self.fix_attributes(fields_to_drop, row)) diff --git a/modules/local/concat_gffs/main.nf b/modules/local/concat_gffs/main.nf index cf911590..7eb1f1e2 100644 --- a/modules/local/concat_gffs/main.nf +++ b/modules/local/concat_gffs/main.nf @@ -21,13 +21,15 @@ process CONCAT_GFFS { input: path ref_gff_path - path repeatmasker_gff - path liftoff_gff + //path repeatmasker_gff + //path liftoff_gff + tuple val(meta), path(repeatmasker_gff), path(liftoff_gff) tuple val(meta), path(fasta_path), path(fastq_1), path(fastq_2) script: """ - repeatmasker_liftoff.py --repeatm_gff $repeatmasker_gff --liftoff_gff $liftoff_gff --refgff $ref_gff_path --fasta $fasta_path + echo "repeatmasker_liftoff.py --repeatm_gff $repeatmasker_gff --liftoff_gff $liftoff_gff --refgff $ref_gff_path --fasta $fasta_path --sample_name $meta.id" + repeatmasker_liftoff.py --repeatm_gff $repeatmasker_gff --liftoff_gff $liftoff_gff --refgff $ref_gff_path --fasta $fasta_path --sample_name $meta.id """ output: diff --git a/modules/local/liftoff_cli_annotation/main.nf b/modules/local/liftoff_cli_annotation/main.nf index df9a8e56..d3292a42 100644 --- a/modules/local/liftoff_cli_annotation/main.nf +++ b/modules/local/liftoff_cli_annotation/main.nf @@ -12,7 +12,7 @@ process LIFTOFF_CLI { 'https://depot.galaxyproject.org/singularity/liftoff:1.6.3--pyhdfd78af_0' : 'quay.io/biocontainers/liftoff:1.6.3--pyhdfd78af_0'}" - publishDir "$params.output_dir/repeatmasker_liftoff_outputs", mode: "copy", overwrite: params.overwrite_output, + publishDir "$params.output_dir/liftoff", mode: "copy", overwrite: params.overwrite_output, saveAs: { filename -> filename.indexOf('.fasta') > 0 ? "fasta/${filename}": filename.indexOf('.txt') > 0 ? "errors/${filename}": @@ -26,7 +26,7 @@ process LIFTOFF_CLI { script: """ - liftoff -g $ref_gff_path -o ${fasta.baseName}_liftoff-orig.gff \ + liftoff -g $ref_gff_path -o ${fasta.baseName}.liftoff-orig.gff \ -u $params.lift_unmapped_features_file_name \ -a $params.lift_coverage_threshold -s $params.lift_child_feature_align_threshold \ -d $params.lift_distance_scaling_factor -flank $params.lift_flank -p $params.lift_parallel_processes \ diff --git a/subworkflows/local/repeatmasker_liftoff.nf b/subworkflows/local/repeatmasker_liftoff.nf index 6aa67588..a349267a 100644 --- a/subworkflows/local/repeatmasker_liftoff.nf +++ b/subworkflows/local/repeatmasker_liftoff.nf @@ -27,15 +27,31 @@ workflow REPEATMASKER_LIFTOFF { params.ref_fasta_path, params.ref_gff_path ) + + repeatmasker_gff_ch = REPEATMASKER.out.gff.collect().flatten() + .map { + meta = [:] + meta['id'] = [id:it.getSimpleName()] + [ meta, it ] + } + + liftoff_gff_ch = LIFTOFF_CLI.out.gff.collect().flatten() + .map { + meta = [:] + meta['id'] = [id:it.getSimpleName()] + [ meta, it ] + } + + concat_gffs_ch = repeatmasker_gff_ch.join(liftoff_gff_ch) // meta.id, fasta, repeatmasker_gff, liftoff_gff + // concat gffs CONCAT_GFFS ( params.ref_gff_path, - REPEATMASKER.out.gff, - LIFTOFF_CLI.out.gff, + concat_gffs_ch, fasta ) emit: fasta = LIFTOFF_CLI.out.fasta gff = CONCAT_GFFS.out.gff -} +} \ No newline at end of file diff --git a/subworkflows/local/submission.nf b/subworkflows/local/submission.nf index dff93e86..5f578863 100644 --- a/subworkflows/local/submission.nf +++ b/subworkflows/local/submission.nf @@ -23,7 +23,6 @@ workflow INITIAL_SUBMISSION { // submit the files to database of choice (after fixing config and getting wait time) if ( params.genbank && params.sra ){ // genbank and sra // submit the files to database of choice (after fixing config and getting wait time) - submission_ch.view() SUBMISSION_FULL ( submission_ch, submission_config ) // actual process to initiate wait @@ -39,7 +38,6 @@ workflow INITIAL_SUBMISSION { .map { it -> [it[0], it[1], it[3], it[4]] } - submission_ch.view() SUBMISSION_SRA ( submission_ch, submission_config ) // actual process to initiate wait @@ -55,7 +53,6 @@ workflow INITIAL_SUBMISSION { .map { it -> [it[0], it[1], it[2], it[5]] } - submission_ch.view() SUBMISSION_GENBANK ( submission_ch, submission_config ) // actual process to initiate wait